從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告
在人們素養(yǎng)不斷提高的今天,報(bào)告使用的頻率越來越高,報(bào)告根據(jù)用途的不同也有著不同的類型。寫起報(bào)告來就毫無頭緒?下面是小編整理的從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望對(duì)大家有所幫助。
從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告1
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、通過綠色植物色素的提取和分離,了解天然物質(zhì)的分離提純與方法。
2、通過薄層色譜分離操作,加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定的原理。
【實(shí)驗(yàn)原理】
葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a{C55H77O5N4Mg}和葉綠素b{ C55H70O6N4Mg };胡蘿卜素是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯,有三種異構(gòu)體;葉黃素C40H56O2是胡蘿卜素的羥基衍生物。當(dāng)提取時(shí),從上到下顏色依次為:黃綠色,藍(lán)綠色,黃色和橙色。
【實(shí)驗(yàn)儀器】
研缽,色譜柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化鋁,菠菜葉,燒杯,漏斗,玻璃棒,濾紙,剪刀,脫脂棉,紗布。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉,用剪刀剪碎,放入研缽中研磨,研磨時(shí)放入少量碳酸鈣,防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié)構(gòu),研磨至爛。
2、將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,蓋上表面皿,防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。
3、浸泡期間,填充色譜柱,在最下面墊入脫脂棉,再蓋上一個(gè)小濾紙片,裝入氧化鋁至4/5處,再蓋上一層濾紙片。
4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中,轉(zhuǎn)入分液漏斗,加入10mL水洗滌,除去水層(下層),再用10mL水洗滌一次。
5、將分頁(yè)漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中,加幾滴丙酮既可以看到顏色變化。
6、洗凈儀器,收拾實(shí)驗(yàn)室,打掃衛(wèi)生。
【實(shí)驗(yàn)記錄】
雖然分層現(xiàn)象不是非常明顯,但是還是可以看得見分層現(xiàn)象。
【結(jié)果與討論】
1、做這個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,我覺得不應(yīng)該用紗布擠干,因?yàn)閭(gè)人感覺很多色素都被
紗布吸走了,導(dǎo)致后來的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象沒有很明顯,經(jīng)過對(duì)比,沒用紗布直接過濾的同學(xué)做出的現(xiàn)象比用紗布做的現(xiàn)象要明顯的多。
2、有機(jī)溶劑往往比較容易揮發(fā),所以加入后要蓋上表面皿。
3、此實(shí)驗(yàn)浸泡15分鐘以后現(xiàn)象就可以很明顯,因此以后在課堂上給學(xué)生演示的時(shí)候浸泡的時(shí)間不是越長(zhǎng)越好的,15分鐘足矣。
4、若最后顏色沒有明顯的分層,可以加入幾滴丙酮幫助分層。
從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告2
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、通過綠色植物色素的提取和分離,了解天然物質(zhì)的分離提純與方法。
2、通過薄層色譜分離操作,加深了解微量有機(jī)物色譜分離鑒定的原理。
【實(shí)驗(yàn)原理】
葉綠色存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素A(C55H77O5N4Mg)和葉綠素B(C55H70O6N4Mg)胡蘿卜素是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯,有三種異構(gòu)體;
葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜素的羥基衍生物。是胡蘿卜素的羥基衍生物。當(dāng)提取時(shí),從上到下顏色依次為:黃綠色,藍(lán)綠色,黃色和橙色。
【實(shí)驗(yàn)儀器】
研缽,色譜柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化鋁,菠菜葉,燒杯,漏斗,玻璃棒,濾紙,剪刀,脫脂棉,紗布。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、稱取30g洗凈后用濾紙喜感的新鮮菠菜葉,用剪刀剪碎,放入研缽中研磨,研磨時(shí)放入少量碳酸鈣,防止研磨過猛破壞葉綠素結(jié)構(gòu),研磨至爛。
2、將研磨碎的菠菜葉轉(zhuǎn)入小燒杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,蓋上表面皿,防止有機(jī)溶劑蒸發(fā)。按小組成員分別浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分鐘。
3、浸泡期間,填充色譜柱,在最下面墊入脫脂棉,再蓋上一個(gè)小濾紙片,裝入氧化鋁至4/5處,再蓋上一層濾紙片。
4、將燒杯中的菠菜葉連帶著有機(jī)溶劑用紗布擠入漏斗中,轉(zhuǎn)入分液漏斗,加入10mL水洗滌,除去水層(下層),再用10mL水洗滌一次。
5、將分頁(yè)漏斗中的溶液慢慢倒入色譜柱中,加幾滴丙酮既可以看到顏色變化。
6、洗凈儀器,收拾實(shí)驗(yàn)室,打掃衛(wèi)生。
【注意事項(xiàng)】
1.過濾時(shí)不能用濾紙,而是用脫脂棉。原因是濾紙能吸收色素,降低濾液中色素的含量,使實(shí)驗(yàn)效果不明顯。
2.加入丙酮后要迅速、充分研磨,以防止丙酮揮發(fā),使更多的色素溶解在丙酮中。
3.萃取過程中注意操作,防止溶液噴出。制備薄層板過程中注意基板的質(zhì)量,防止玻璃邊緣傷及手指。
4.牢記有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)安全防范和急救措施。
從菠菜中提取葉綠素實(shí)驗(yàn)報(bào)告3
綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素(綠)、胡蘿卜素(橙)和葉黃素(黃)等多種天然色素。
葉綠素存在兩種結(jié)構(gòu)相似的形式即葉綠素a(C55H72O5N4Mg)和葉綠素b(C55H70O6N4Mg)),差別僅是a中一個(gè)甲基被b中的甲酰基所取代。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡(luò)合物,是植物進(jìn)行光合作用所必需的催化劑,也是食用的綠色色素,可用于糕點(diǎn)、飲料水等中,添加于膠姆糖中還可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。盡管葉綠素分子中含有一些極性基團(tuán),但大的烴基結(jié)構(gòu)使它易溶于石油醚等一些非極性溶劑。
胡蘿卜素(C40H56)是具有長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)的共軛多烯。它有三種異構(gòu)體α—,β—,和γ—胡蘿卜素,其中β—異構(gòu)體含量最多,也最重要。生長(zhǎng)期較長(zhǎng)的綠色植物中,異構(gòu)體中β—的含量多達(dá)90%。β—具有維生素A的生理活性,其結(jié)構(gòu)是兩分子維生素A在鏈端失去兩分子水結(jié)合而成。生物體內(nèi),β—體受酶催化氧化即形成維生素A。目前,β—體可作為維生素A使用,也可作為食品工業(yè)的色素,β一胡蘿卜素還有防癌功能。
葉黃素(C40H56O2)是胡蘿卜素的羥基衍生物,在光合作用中能起收集光能的.作用。在綠葉中通常是胡蘿卜素的兩倍。較易溶于醇而在石油醚中溶解度較小。由此可見,葉綠素等天然色素有廣泛的用途,對(duì)于色素的提取與分離就顯得很重要了.本實(shí)驗(yàn)就提取和分離做了相關(guān)的研究。
1實(shí)驗(yàn)部分
1.1儀器與試劑
儀器:研缽、分液漏斗、顯微載玻片、毛細(xì)管、層析柱(20×10 cm)、UV-240
紫外分光光度計(jì)
試劑:石油醚、乙醇(95%)、菠菜葉、丙酮(化學(xué)純)、乙酸乙酯(化學(xué)純)、無
水硫酸鈉、硅膠G、中性氧化鋁(150目~160目)
1.2提取與分離
1.2.1浸泡法提取色素
在研缽中放入20 g新鮮的菠菜葉,加入20 mL3:2(體積比)石油醚—乙醇混合液,適當(dāng)研磨(不要研成糊狀,否則會(huì)給分離造成困難),用傾析法將提取液轉(zhuǎn)
移到分液漏斗中,每次用10ml水洗滌兩次,以除去萃取液中的乙醇。洗滌時(shí)要輕輕旋蕩,以防乳化。棄去水乙醇層,石油醚層用無水硫酸鈉干燥,干燥后濾入小圓底燒瓶,在水浴上蒸發(fā)濃縮至大約l m L。
1.2.2薄層層析
取四塊顯微載玻片,硅膠G經(jīng)0.5%羧甲基纖維素鈉調(diào)制后制板,在室溫下晾干后在110°C活化1h。選取效果最好的一塊進(jìn)行點(diǎn)樣。
展開劑:(1)石油醚—丙酮=8:2(體積比)
。2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(體積比)
取活化后的層析板,點(diǎn)樣,放入預(yù)先選定展開劑的廣口瓶。瓶的內(nèi)壁貼一張高5cm,繞周長(zhǎng)4/5的濾紙,下部浸入展開劑中,蓋上瓶蓋。待展開劑上升至規(guī)定高度時(shí),取出層析板,晾干,做出標(biāo)記。
分別用兩種展開劑展開,比較不同展開劑的展開效果。觀察斑點(diǎn)在板上的位置并排列出胡蘿卜素、葉綠素和葉黃素的Rf值的大小。注意更換展開劑時(shí),需干燥層析瓶,不允許前一種展開劑帶入后一系統(tǒng)。
1.2.3柱層析
取少量脫脂棉在小燒杯中用石油醚浸潤(rùn)后,擠壓除去氣泡,放在層析柱底部。在層析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化鋁8克,打開柱下活塞,保持石油醚高度不變,氧化鋁在柱子中堆積。裝完后,打開下端活塞,放出溶劑,直到氧化鋁表面剩下1—2mm高為止(不能使氧化鋁表面露出液面)。
將濃縮液用滴管加到柱頂部,打開下端活塞,讓液面下降到柱面以下1mm,關(guān)閉活塞,加數(shù)滴石油醚,打開活塞,使液面下降,幾次反復(fù),使色素全部進(jìn)入柱體。
在柱頂加1.5cm洗脫劑——9:1(體積比)石油醚—丙酮。打開活塞,用錐形瓶收集。當(dāng)?shù)谝粋(gè)有色成分即將滴出時(shí),取另一錐形瓶收集,得橙黃色溶液,即胡蘿卜素。
2.結(jié)果與討論
2.1提取
由于甲醇與乙醇的極性相近,但是乙醇易得、無毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通過浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇。
2.2分離
薄層層析
薄層層析又叫薄層色譜,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬固—液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),可以用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離。實(shí)驗(yàn)中涉及的菠菜色素的比移值(Rf)(薄層色譜法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值)列表如下:
在一定的色譜條件下,特定化合物的Rf值是一個(gè)常數(shù),因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。
菠菜色素中各種色素的比移值Rf大小為:胡蘿b素>葉黃素>葉綠素,按此順序它們的非極性依次減弱。物質(zhì)極性的判斷為柱層析中洗脫劑的選擇提供了參考價(jià)值。
柱層析
胡蘿卜素極性最小,因此胡蘿卜素的洗脫劑用極性較小的9:l的石油醚-丙酮溶劑效果較好。但要收集其他幾種色素得換用其他的洗脫劑,因?yàn)樯氐臉O性各不相同,且有一定差別。如用7:3石油醚-丙酮分離葉黃素.分離出胡蘿卜素和葉
黃素后,可加大溶劑極性以較快速度洗脫葉綠素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗
脫劑洗脫葉綠素。
3.結(jié)論
采用浸泡法提取色素比抽濾法更好。在薄層層析時(shí),用石油醚-丙酮=8:2時(shí),能更明顯的看到分層。在柱色譜洗脫劑的選擇上,基于薄層分析的極性判斷選擇了石油醚-丙酮=9:1的溶劑作為洗脫劑,取得了非常好的效果。通過實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到洗脫劑在柱層析中的重要性。
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