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實(shí)驗(yàn)實(shí)施方案

時(shí)間:2024-09-04 09:39:47 方案 我要投稿

實(shí)驗(yàn)實(shí)施方案

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實(shí)驗(yàn)實(shí)施方案

  藥品:

  半枝蓮、95%乙醇、鹽酸小檗堿對(duì)照品、蒸餾水、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液、碘-碘化鉀試劑

  儀器:

  722型紫外分光光度計(jì)、電子分析天平、電熱恒溫水浴鍋、數(shù)據(jù)超聲波清洗器、微型植物粉碎機(jī)、PH計(jì)、加熱板、循環(huán)水式多用真空泵

  實(shí)驗(yàn)方法:

  超生波提取法、半仿生法、正交實(shí)驗(yàn)、生物堿的鑒定方法

  實(shí)驗(yàn)步驟:

  一、藥品、儀器的準(zhǔn)備

  二、對(duì)照品溶液的制備、波長(zhǎng)的測(cè)定、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作、推算出回歸方程

  三、樣液的制備

  四、用半仿生法提取半枝蓮中生物堿

  1、單因素實(shí)驗(yàn)

  (1)溫度對(duì)提取效果的影響

  (2)酸度對(duì)提取效果的影響

  (3)堿度對(duì)提取效果的影響

  (4)料液比對(duì)提取效果的影響

  2、因素、水平的確定及進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):

  由單因素溫度、酸度、堿度和料液比作為正交試驗(yàn)的四個(gè)水平

  進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)以確定半仿生法中最優(yōu)的提取條件

  五、超聲波輔助半仿生法提取半枝蓮生物堿:在上述半仿生法得到的最優(yōu)提取條件下進(jìn)行超聲波提取

  1、單因素實(shí)驗(yàn)

  (1)溫度對(duì)提取效果的影響

  (2)提取次數(shù)對(duì)提取效果的影響

  (3)酒精濃度對(duì)提取效果的影響

  2、因素、水平的確定及進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):

  由單因素溫度、提取次數(shù)、酒精濃度作為正交試驗(yàn)的三個(gè)水平進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)以確定在超聲波輔助半仿生法提取中的最優(yōu)條件

  六、在超聲波輔助半仿生法提取的最優(yōu)條件下提取半枝蓮中生物堿

  七、利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定上述提取到的生物堿的吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行比較,計(jì)算出生物堿的量及產(chǎn)率。

  八、生物堿的鑒定:

  生物堿沉淀反應(yīng)

  1、碘化鉍鉀試劑反應(yīng) 取滲漉液1ml,加碘化鉍鉀試劑1滴~2滴,生成棕色至棕紅色者為陽(yáng)性反應(yīng)在。

  2、碘-碘化鉀試劑反應(yīng) 取滲漉液1ml,加碘-碘化鉀試劑1滴~2滴,生成棕黃色沉淀者為陽(yáng)性反應(yīng)。

  3、硅鎢酸試劑反應(yīng) 取滲漉液1ml,加硅鎢酸試劑數(shù)滴,生成淡黃色沉淀者為陽(yáng)性反應(yīng)。

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