NOD1真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)

目的:構(gòu)建天然免疫胞內(nèi)識(shí)別受體核苷酸寡聚域1(NOD1)真核表達(dá)質(zhì)粒.方法:MOD1基因片段經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得,經(jīng)酶切后連接到真核表達(dá)載體pcDNA3/flag中,對(duì)挑選出的陽性克隆測(cè)序,將序列正確的重組質(zhì)粒pflagNOD1轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,用Western印跡檢測(cè)目的蛋白的表達(dá),同時(shí)用NF-KB的螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)NOD1蛋白的活性.結(jié)果:pflag-NOD1可以在真核細(xì)胞293T中表達(dá),并可以增強(qiáng)NF-κB報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄活性.結(jié)論:構(gòu)建了重組質(zhì)粒pflag-NOD1,在細(xì)胞中表達(dá)NOD1后能夠提高NF-KB轉(zhuǎn)錄的生物活性,為進(jìn)一步研究NOD1的功能奠定了基礎(chǔ).

作 者： 陳宣男 何湘 姜錚 王雪松 劉大偉 郭燕紅 袁靜 甄清 CHEN Xuan-Nan HE Xiang JIANG Zheng WANG Xue-Song LIU Da-Wei GUO Yan-Hong Yuan Jing ZHEN Qing   作者單位： 陳宣男,CHEN Xuan-Nan(吉林大學(xué),公共衛(wèi)生學(xué)院,吉林,長(zhǎng)春,130021;中國(guó)人民解放軍,疾病預(yù)防控制所,北京,100071)

何湘,姜錚,王雪松,劉大偉,郭燕紅,袁靜,HE Xiang,JIANG Zheng,WANG Xue-Song,LIU Da-Wei,GUO Yan-Hong,Yuan Jing(中國(guó)人民解放軍,疾病預(yù)防控制所,北京,100071)

甄清,ZHEN Qing(吉林大學(xué),公共衛(wèi)生學(xué)院,吉林,長(zhǎng)春,130021) 

刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： NOD1   NF-κB   真核表達(dá)   螢光素酶報(bào)告基園  

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