枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶在畢赤酵母中的分泌表達(dá)

目的:研制高效分泌表達(dá)枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶的畢赤酵母基因工程菌株.方法與結(jié)果:將優(yōu)化設(shè)計的枯草芽孢桿菌MA139 β-甘露聚糖酶基因用EcoR Ⅰ/XbαⅠ雙酶切,克隆到誘導(dǎo)型表達(dá)載體pPICzαA中α因子信號肽編碼序列的下游,轉(zhuǎn)化大腸桿菌篩選重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化畢赤酵母X-33感受態(tài)細(xì)胞,經(jīng)Zeocin篩選,獲得重組表達(dá)菌株X-33/mann.將重組菌株在10 L全自動發(fā)酵罐中進(jìn)行高密度發(fā)酵培養(yǎng),甲醇誘導(dǎo)72 h發(fā)酵活力達(dá)到2100 U/mL.重組甘露聚糖酶的最適催化溫度為40℃,最適催化pH值為6.0.結(jié)論:枯草芽孢桿菌β-甘露聚糖酶在畢赤酵母中獲得了高效分泌表達(dá),具有開發(fā)作為飼料添加劑的潛能.

作 者： 馬威 沈志娜 陳軼群 李志民 曹云鶴 MA Wei SHEN Zhi-Na CHEN Yi-Qun LI Zhi-Min CAO Yun-He   作者單位： 馬威,陳軼群,李志民,曹云鶴,MA Wei,CHEN Yi-Qun,LI Zhi-Min,CAO Yun-He(中國農(nóng)業(yè)大學(xué),動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室,北京,100193)

沈志娜,SHEN Zhi-Na(哈爾濱師范大學(xué),生命科學(xué)院,黑龍江,哈爾濱,150025) 

刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號： Q785  關(guān)鍵詞： β-甘露聚糖酶   枯草芽孢桿菌   畢赤酵母   分泌表達(dá)  

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