乙肝病毒X基因重組腺病毒載體的構(gòu)建

目的 為了探討HBx基因與肝癌發(fā)生的關(guān)系,構(gòu)建HBx基因重組腺病毒載體.方法 應用pAdEasyTM腺病毒載體系統(tǒng),首先從質(zhì)粒pCDNA3.l-HBx中酶切得到HBx基因,插入腺病毒穿梭質(zhì)粒pAdTrack-CMV中,得到pAdTrack-CMV-HBx,將其PmeⅠ酶切線性化后,轉(zhuǎn)到含腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1的BJ5183感受態(tài)細菌中,通過同源重組得到重組腺病毒質(zhì)粒載體pAd-HBx,經(jīng)PacⅠ酶切線性化后轉(zhuǎn)染人胚腎293細胞,產(chǎn)生重組腺病毒顆粒Ad-HBx.結(jié)果 　PCR和酶切鑒定證明重組腺病毒Ad-HBx構(gòu)建成功,在轉(zhuǎn)染的293細胞中可以觀察到綠色熒光蛋白GFP.結(jié)論 　成功構(gòu)建了攜帶HBx基因的重組腺病毒載體,為后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 史震 李向陽 周峰 李金龍 尤紅娟 湯仁仙 SHI Zhen LI Xiangyang ZHOU Feng LI Jinlong YOU Hongjuan TANG Renxian   作者單位： 徐州醫(yī)學院微生物與免疫學教研室,江蘇,徐州,221002  刊 名： 徐州醫(yī)學院學報  ISTIC 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU  年，卷(期)： 2010 30(3)  分類號： Q782 R512.6+2  關(guān)鍵詞： 乙型肝炎病毒   HBx基因   腺病毒載體  

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