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利用FLP/frt重組系統(tǒng)產(chǎn)生無選擇標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因煙草植株
在植物轉(zhuǎn)基因植株產(chǎn)生過程中,對(duì)轉(zhuǎn)化細(xì)胞進(jìn)行抗性篩選是通用程序,轉(zhuǎn)化細(xì)胞的抗性一般是抗生素抗性或除草劑抗性,將賦予轉(zhuǎn)化細(xì)胞抗性的選擇標(biāo)記基因刪除是提高轉(zhuǎn)基因植物生物安全性的重要措施.來自于啤酒酵母的FLP/frt位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)可有效刪除同向定點(diǎn)重組位點(diǎn)frt之間的基因.通過多步驟重組,建立了可在植物中廣泛應(yīng)用的FLP/frt位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng).該系統(tǒng)包括含有frt位點(diǎn)的植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-betA-frt-als-frt和含有由熱誘導(dǎo)啟動(dòng)子hsp啟動(dòng)的FLP重組酶基因的植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-hsp-FLP-hpt.利用二次轉(zhuǎn)化的方式將二者先后轉(zhuǎn)入煙草植株,熱激處理后,熱誘導(dǎo)型啟動(dòng)子hsp調(diào)控的重組酶FLP基因的表達(dá)催化位于選擇標(biāo)記基因als兩側(cè)同向frt位點(diǎn)間的重組反應(yīng),有效地刪除了選擇標(biāo)記基因als.41%的經(jīng)熱激處理的二次轉(zhuǎn)化植株發(fā)生了選擇標(biāo)記基因的刪除,表明該系統(tǒng)在獲得無選擇標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因植株中有很好的應(yīng)用價(jià)值.
作 者： 單曉昳 李蓓 張舉仁 SHAN Xiao-Yi LI Bei ZHANG Ju-Ren 作者單位： 山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,濟(jì)南,250100 刊 名： 生物工程學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(5) 分類號(hào)： Q785 關(guān)鍵詞： 選擇標(biāo)記基因 FLP/frt 位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng) hsp熱誘導(dǎo)啟動(dòng)子【利用FLP/frt重組系統(tǒng)產(chǎn)生無選擇標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因煙草植株】相關(guān)文章：
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