重組SARS-CoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性檢測

目的 對嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spike, S)S1段進(jìn)行原核重組表達(dá),并檢測表達(dá)產(chǎn)物的抗原性.方法 對S1中的HLA抗原表位進(jìn)行預(yù)測分析,根據(jù)分析結(jié)果選定用于重組表達(dá)的區(qū)段,利用pET21b載體進(jìn)行原核表達(dá),將產(chǎn)物純化后利用SARS抗血清進(jìn)行抗原性檢測.結(jié)果 抗原表位分析表明,S1中包含有多個(gè)能夠被HLA分子有效提呈的抗原表位,綜合考慮表位肽的分布、重組表達(dá)的效率、重組蛋白的空間構(gòu)象以及引物設(shè)計(jì)的優(yōu)化等因素,選取S1中的關(guān)鍵區(qū)域259～565 aa進(jìn)行原核重組表達(dá),得到了包涵體形式的重組蛋白,經(jīng)過純化和復(fù)性,獲得了純度較高的可溶性S1蛋白;用SARS抗血清對此重組蛋白進(jìn)行免疫學(xué)鑒定,表明該蛋白具有SARS特異的抗原性.結(jié)論 重組表達(dá)的S1蛋白具有較強(qiáng)的抗原性,為進(jìn)一步的疫苗研究和抗體篩選奠定了基礎(chǔ).

作 者： 邵紅偉 藍(lán)東明 陳尚武 劉澤寰 黃樹林 SHAO Hong-wei LAN Dong-ming CHEN Shang-wu LIU Ze-huan HUANG Shu-lin   作者單位： 邵紅偉,黃樹林,SHAO Hong-wei,HUANG Shu-lin(廣東藥學(xué)院,生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院/生物制藥研究所,廣東,廣州,510006)

藍(lán)東明,陳尚武,LAN Dong-ming,CHEN Shang-wu(中山大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,廣東,廣州,510275)

劉澤寰,LIU Ze-huan(暨南大學(xué),生命與健康工程研究院,廣東,廣州,510632) 

刊 名： 廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY  年，卷(期)： 2008 24(3)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： SARS   S1蛋白   抗原表位   重組表達(dá)  

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