葛仙米中SOD基因的克隆及在大腸桿菌中的表達

采用PCR技術(shù)從葛仙米(Nostoc sphaeroides)總DNA中克隆了一段基因序列,該序列與基因庫中已公布的編碼普通念珠藻(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性為98%.將該基因插入含,T7啟動子的質(zhì)粒pET-32a(+)中構(gòu)建表達質(zhì)粒pET-sod,然后將該表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21中進行蛋白表達,表達菌株用1mmol/L IPTG誘導表達數(shù)小時后,產(chǎn)生較多重組的蛋白,且該蛋白以可溶性蛋白形式存在.SDS-PAGE分析表明:在相對分子量約為22kd的位置有一條明顯蛋白質(zhì)帶.將誘導表達后的蛋白通過親和層析的方法進行蛋白純化;NBT光還原法測定表達產(chǎn)物的比活力,每毫克純化蛋白約為2550U.

作 者： 汪瀅 章秀 吳雙秀 王全喜 WANG Ying ZHANG Xiu WU Shuang-xiu WANG Quan-xi   作者單位： 上海師范大學生命與環(huán)境科學學院,上海,200234  刊 名： 上海師范大學學報（自然科學版）  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)  年，卷(期)： 2008 37(3)  分類號： Q785 Q949.22  關鍵詞： 葛仙米   SOD基因克隆   誘導表達  

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